试剂盒标准20**年0412

尿液人类免疫缺陷病毒I 型抗体酶联免疫诊断试剂盒

质 量 标 准

1．参考品

1．1用途： 用于尿液HIV 抗体诊断试剂盒的质量控制

1．2来源： 检测来自不同地区（山东、山西、河南、北京）的阴性尿样400份（参见产品

性能评价部分），按正态分布选择了10份正常人尿液加入10%的冰冻保护液，作为阴性参考品；检测来自不同地区（山西、河南、北京）的阳性尿样60份（参见产品性能评价部分）。选择了8份阳性尿样加入10%的冰冻保护液，作为阳性参考品；从上述检测出的阳性尿样中选四份A 值最低（在Cut off值附近）的尿样，加入10%的冰冻保护液，作为最低检出限参考品。用上述检测出的60份阳性尿样中的一份阳性尿样，加入10%的冰冻保护液，作为精密性参考品。

1．3组成： 参考品由以下成分构成

HIV-1型阴性参考品： 10份（N 1-- N10，各1mL/1支）

HIV-1型最低检出限参考品： 4份（P 1--P 4，各1mL/1支）

HIV-1型阳性参考品： 8份（P 5--P 12，各1mL/1支）

精密性参考品： 1份（P 13，共10支各1.2mL/1支）

1．4测定A 值

1．4．1阴性参考品（见表1）

表1： 阴性参考品测定A 值

参考品编号 N1 N2 N3 检测A 值 ≤0.15 ≤0.12 ≤0.15

参考品编号 N4 N5 N6 检测A 值 ≤0.18 ≤0.18 ≤0.12

参考品编号 N7 N8 N9 检测A 值 ≤0.10 ≤0.10 ≤0.18

参考品编号 N10

检测A 值 ≤0.15

1．4．2 阳性参考品（见表2）

表2： 阳性参考品测定A 值

参考品编号 P5 P6 P7 检测A 值 ≥0.4 ≥0.4 ≥0.4

参考品编号 P8 P9 P10 检测A 值 ≥0.7 ≥0.7 ≥0.5

参考品编号 P11 P12

检测A 值 ≥1.0 ≥1.8

1．4．3最低检出限参考品（见表3）。

表3： 最低检出限参考品测定A 值

参考品编号 P1 P2 P3 检测A 值 ≥0.3 ≥0.25 ≥0.25

参考品编号 P4

检测A 值 ≥0.25

1．4．4 精密性参考品：P13测定A 值≥0.4。

2．质量标准

2．1成品质量标准

2．1．1外观及完整性质量标准：包装洁净完整无缺损，标签文字清晰，批号和效期正确。打开真空包装，抗原包被微孔板透明，底部有很少量肉眼可见物；液体应透明，无肉眼可见物。

铝箔袋真空封装抗原包被微孔板 （96孔）一块

尿样冰冻保护液 （11mL 棕色盖13mL 瓶装）一瓶

尿样稀释液 （2.5mL 兰色盖8mL 瓶装）一瓶

酶标抗体工作液 （11mL 黑色盖8mL 瓶装）一瓶

阳性对照 （2.5mL 红色盖8mL 瓶装）一瓶

阴性对照 （2.5mL 绿色盖8mL 瓶装）一瓶

显色液A （6mL 白色盖8mL 瓶装）一瓶

显色液B （6mL 黑色盖8mL 瓶装）一瓶

终止液 （6mL 黄色盖8mL 瓶装）一瓶

20×洗液 （50mL 白色盖50mL 瓶装）一瓶

说明书一份

自封袋一个

封板膜二张

2．1．2反应性质量标准：

检测阴性参考品N1-N10全部为阴性结果；

检测阳性参考品P5-P12全部为阳性结果；

检测4份最低检出限参考品P1-P4至少3份为阳性结果；

精密性参考品P13平行检测12孔的CV （%）≤15%。

2．1．3稳定性质量标准：37℃放置5天（120小时）后

检测阴性参考品N1-N10全部为阴性结果；

检测阳性参考品P5-P10全部为阳性结果；

检测4份最低检出限参考品P1-P4至少3份为阳性结果；

精密性参考品P13平行检测12孔的CV （%）≤15%。

2．1．4成品检定方法

2．1．4．1取样

每100个试剂盒随机抽取2个进行质量检验。

2．1．4．2检验方法

物性： 对试剂盒中各组分进行物性、外观和数量进行查验。符合“成品质量标

准”的为合格。

反应性： 抽检样品按说明书操作方法进行检验，参考品测试的A 值符合“成品质

量标准”中反应性要求的为合格。

稳定性： 对37℃放置5天（120小时）的抽检样品按说明书操作方法进行检验，

检验结果符合“成品质量标准”中稳定性要求的为合格。

2．2半成品质量标准

2．2．1半成品的范围：铝箔袋真空封装抗原包被微孔板、尿样冰冻保护液、尿样稀释液、

酶标抗体工作液、显色液A 、显色液B 、终止液、阴性对照、阳性对照。

2．2．2半成品的物性质量标准：打开真空包装，抗原包被微孔板透明，底部有很少量肉眼

可见物；各配属液体应透明，无肉眼可见物。

2．2．3半成品的反应性质量标准：

2．2．3．1阴性对照A 值≤0.15；阳性对照的A 值≥1.5

2．2．3．2尿样稀释液、20×洗涤液、显色液A 、显色液B 、终止液：用单因素替代法检测

检测阴性对照和阳性对照，同参比试剂盒之间的差异不得超过15%。

2．2．3．3酶标抗体工作液：检测阴性参考品N1-N10全部为阴性结果；检测阳性参考品P5-P12

全部为阳性结果；检测4份最低检出限参考品P1-P4全部为阳性结果。

2．3．3．4抗原包被微孔板：检测阴性参考品N1-N10全部为阴性结果；检测阳性参考品P5-P12

全部为阳性结果；检测4份最低检出限参考品P1-P4全部为阳性结果；

平行检测12孔精密性参考品P13检测CV （%）≤15%。

2．2．4半成品的稳定性质量标准：

2．2．4．1酶标抗体工作液：37℃放置5天（120小时）后检测阴性参考品N1-N10全部为

阴性结果；检测阳性参考品P5-P12全部为阳性结果；检测4份最低检

出限参考品P1-P4全部为阳性结果。

2．2．4．2抗原包被微孔板：37℃放置5天（120小时）后检测阴性参考品N1-N10全部为

阴性结果；检测阳性参考品P5-P12全部为阳性结果；检测4份最低检

出限参考品P1-P4全部为阳性结果；平行检测12孔精密性参考品P13

的检测CV （%）≤15%。

2．2．5半成品的检定方法

2．2．5．1取样

抗原包被微孔板：对己干燥的封闭过的抗原包被微孔板在真空封装

前抽样进行质量检验，随机抽取8块板，其中每块板随机取一条组成一

块新板，对新板做质量检验；

溶液半成品：溶液半成品在分装前，分取各组分一个试剂盒的量，

进行质量检验（20×洗液50mL 、 阳性对照2.5mL 、 阴性对照2.5mL 、

显色液A 6 mL 、显色液B 6mL 、 终止液 6mL、尿样冰冻保护液 11 mL 、

尿样稀释液 2.5 mL）。

2．2．5．2检验方法： 使用本公司作为质量控制的标准尿液HIV-1抗体酶联免疫试剂盒

对溶液半成品，按单因素替换标准试剂盒相应组分进行检验，参考品

测试的A 值要符合“半成品质量标准”要求的为合格。

2．3原料质量标准

2．3．1抗原质量标准： 纯度大于95%，分子量为12.4KD 。按100ng/孔包被后直接检测、

检测阴性参考品N1-N10全部检出阴性、阳性参考品P5-P12全部检出

阳性，4份最低检出限参考品P1-P4全部检出阳性。

2．3．2酶标抗体质量标准：稀释比例大于1：400，用酶标抗体稀释液稀释后直接检测、检

测阴性参考品N1-N10全部检出阴性、阳性参考品P5-P12全部检出阳

性，4份最低检出限参考品P1-P4全部检出阳性。

2．3．3新生牛血清质量标准：颜色为琥珀色、清亮无可见沉淀物；无菌、无支原体。

2．3．4微孔板质量标准：符合成品试剂盒检测标准，精密性参考品P13，CV 值应小于10%，

P13的A 值应≥0.4。

2．3．5保温盒质量标准：尺寸（长14.5cm 、宽9.3cm 、高9cm ）；外观（清洁无破损）。

2．3．6组分标签的质量标准：抗原包被微板标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、

外观清洁无破损）；尿样冰冻保护液标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文

字印刷清晰、外观清洁无破损）；酶标抗体工作液标签（长51.5mm 、

宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清洁无破损）；20×洗液标签（长

51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清洁无破损）；尿样稀释液

标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清洁无破损）；阴

性对照标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清洁无破损）；

阳性对照标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清洁无破

损）；显色液A 标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、外观清

洁无破损）；显色液B 标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清晰、

外观清洁无破损）；终止液标签（长51.5mm 、宽21.2mm 、文字印刷清

晰、外观清洁无破损）。

2．3．7密封袋质量标准：尺寸（长14.5cm 、宽9.3cm ）；外观（清洁无破损无气孔）。

2．3．8说明书质量标准：尺寸（B5纸）；文字印刷（清晰）；外观（清洁无破损）。

2．3．9包装纸盒质量标准：尺寸（长14.5cm 、宽9.3cm 、高9cm ）；外观（清洁无起皱或破

损）。

2．3．10纸盒标签质量标准：尺寸（长97mm 、宽67.7mm ）；文字印刷（清晰）；外观（清洁

无破损）。

2．3．11化学试剂质量标准：纯度级别要求化学纯以上；包装外观无破损、标签无缺失；试

剂色泽均一；溶于溶剂后颜色均一、清亮、无杂质。

2．3．12原料检定方法

2．3．12．1重组抗原： 抽样重组抗原按生产操作手册要求用gp41抗原包被微孔板，用参

比试剂盒按说明书操作程序测阴性参考品N1-N10及阳性参考品

P5-P12和最低检出限参考品P1-P4。

2．3．12．2酶标抗体： 抽样酶标抗体按1：800稀释度, 按生产操作手册要求配制酶标抗

体工作液，用参比试剂盒按说明书操作程序测阴性参考品N1-N10及

阳性参考品P5-P12和最低检出限参考品P1-P4。

2．3．12．3微孔板： 从原料微孔板中随机抽取8块板, 每块板随机抽取一条，合并成一

板，按生产工艺制作抗原包被微孔板，然后按说明书操作程序测阴性

参考品N1-N10及阳性参考品P5-P12和最低检出限参考品P1-P4。平

行检测12份P13的A 值。

2．3．12．4新生牛血清：要求厂家分析证书无菌、无支原体检测合格。外包装及色泽直接

观察。

2．3．12．5保温盒：尺寸用标准保温盒比对，外观直接观察。

2．3．12．6组分标签：尺寸及文字印刷用标准组分标签比对，外观直接观察。

2．3．12．7自封袋：尺寸用标准自封袋比对，外观直接观察。

2．3．12．8说明书：尺寸及文字印刷用标准说明书比对，外观直接观察。

2．3．12．9包装纸盒：尺寸用标准纸盒比对，外观直接观察。

2．3．12．10纸盒标签：尺寸及文字印刷用标准纸盒标签比对，外观直接观察。

2．3．12．11化学试剂：纯度级别应符合要求，外包装及试剂色泽直接观察，将试剂溶解于

水（TMB 用二甲基甲酰胺溶解）中进行观察。