女贞子的化学成分研究_黄晓君

#化学#

女贞子的化学成分研究

黄晓君, 殷志琦, 叶文才

1, 2*

, 沈文斌

(11中国药科大学天然药物化学教研室, 江苏南京210009; 21暨南大学中药及天然药物研究所, 广东广州510632;

31中国药科大学分析测试中心, 江苏南京210009)

[摘要] 目的:研究女贞Ligustru m l uci du m 的干燥成熟果实的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱, Sephadex LH-20凝胶柱色谱和OD S 柱色谱等色谱方法进行分离纯化, 并根据NM R, M S 等波谱方法和理化性质鉴定其化学结构。结果:从女贞子中分离得到20个化合物, 其中三萜类化合物15个, 分别鉴定为齐墩果酸(1) , 2A -羟基齐墩果酸(2), 乙酰齐墩果酸(3), 羽扇豆醇(4), 白桦脂醇(5), 达玛烯二醇(6) , 3B -乙酰氧基-20, 25-环氧-24A -羟基-达玛烷(7) , 20, 25-环氧-3B , 24A -二羟基-达玛烷(8), 3B -乙酰氧基-达玛烯二醇(9), 3B , 20S -二羟基-24R -过氧羟基-25-烯-达玛烷(10) , fouqu i ero l (11), o liganthas A (12), 达玛烯二醇3-O -棕榈酸酯(13), 拟人参皂苷元II 3-O -棕榈酸酯(14), 3B , 20S -二羟基-25-过氧羟基-23E -烯-达玛烷(15); 苯乙醇类化合物5个, 分别为毛蕊花苷(16), 北升麻宁(17), 2-(3, 4-二羟基苯基) 乙基-O-B -D 吡喃葡萄糖苷(18), os m anthus i de H (19), 3, 4-二羟基苯基乙醇(20) 。结论:化合物4, 16, 17, 19为首次从本植物中分离得到, 化合物12~15为首次从本属植物中分离得到。

[关键词] 女贞子; 化学成分; 三萜; 苯乙醇苷

女贞子是木犀科植物女贞L igustrum l u ci d um A it 1的干燥成熟果实, 为我国传统中药, 主要分布于湖南、四川、江苏和浙江等地。女贞子自古常用做滋补药材, 具有滋补肝肾, 明目乌发功效, 用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白等。据国内外的文献报道

[1-9]

ries LC /MSD Trap 质谱仪。柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂) 和薄层色谱硅胶GF254(烟台化工研究

所); Sephadex L H-20(Phar m ac i a 公司), ODS (C 18, 德国M erck 公司) 。所用试剂均为分析纯。

女贞子于2006年5月在安徽亳州购得, 经中国药科大学秦民坚教授鉴定为L 1lucidum , 标本(NO20060517) 保存于中国药科大学中药学院天然药化教研室。2 提取与分离

干燥的女贞子果实40kg , 粉碎成粗粉, 80%乙醇加热回流提取3次, 每次2h, 减压回收溶剂得浸膏4500g 。加水混悬后依次用石油醚、醋酸乙酯、水饱和正丁醇萃取, 分别得到石油醚部位(194g ) 、醋酸乙酯部位(2400g) 、正丁醇部位(1200g) 。石油醚部位(194g ) 经硅胶柱色谱分离, 石油醚-醋酸乙酯(100B 1~50B 50) 梯度洗脱得Fr 11~Fr 13; Fr 11经硅胶柱色谱分离, 石油醚-醋酸乙酯(100B 1~100B 10) 梯度洗脱, 再经Sephadex L H-20柱色谱纯化, 得化合物4(300m g), 6(200m g), 10(10m g ) 。Fr 12经反复硅胶色谱分离和Sephadex LH-20柱色谱纯化, 得化合物3(200m g ), 7(50m g), 8(20m g ), 12(50mg ), 13(21mg ), 14(12

, 目前从女贞子中分离得到的化合物主要为三

萜类、环烯醚萜苷类以及苯乙醇苷类。近年来的研究发现女贞子具有多种生理活性, 特别是增强免疫活性作用

[10]

受到人们的广泛关注, 因此对女贞子进

行较为系统的化学成分研究, 探索其化学结构与生理活性之间的关系, 具有重要学术价值和应用前景。本文对女贞子进行了系统的化学成分研究, 从其石油醚和正丁醇部分分离得到20个化合物。1 仪器与试药

X -4熔点测定仪(温度计未校正); N ico let I m -pact 410型红外光谱仪(KB r 压片); B r uker AV-500, AV-400和AV-300型核磁共振仪; Ag ilent 1100Se -[收稿日期] 2009-06-02

[基金项目] 国家杰出青年科学基金(30625039) [通信作者] 126. co m;

殷志琦, Te:l (025) 85391099, E -ma i :l chyz q2005@

(025) 85322132, E-m ai:l

chyw c@ya -

叶文才, T e:l

hoo 1co m 1cn

m g), 15(22m g ) 。Fr 13经反复硅胶色谱分离和

Sephadex L H-20柱色谱纯化, 得化合物5(100m g), 9(18m g), 11(20m g) 。正丁醇部位(1200g ) 经硅胶柱色谱分离, 以氯仿-甲醇(9B 1~1B 1) 梯度洗脱的

Fr 11~Fr 13; Fr 11经硅胶柱色谱分离, 氯仿-甲醇(100B 0~9B 1) 梯度洗脱, 再经硅胶柱色谱分离, 石油醚-醋酸乙酯-丙酮(8B 1B 1) 分离, 得化合物1(5g), 2(10m g), 20(10m g); Fr 12经ODS 柱色谱, 甲醇水(15%~90%) 梯度洗脱, 再经Sephadex LH-20柱色谱, 70%甲醇水纯化, 得化合物16(10m g), 17(10m g), 18(10m g), 19(10m g) 。3 结构鉴定

化合物4 无色针晶(氯仿), m p 202~204e 。E I -M S m /z427[M+H ]。H-NM R (CDC l 3, 500MH z) D :0176, 0179, 0183, 0195, 0197, 1103, 1168(each 3H, s , M e -23, 24, 25, 26, 27, 28, 30), 3118(1H, dd, J =513, 1018H z , H-3), 4157(1H,

br s , H-29B ), 4168(1H, d , J =119H z , H-29A ) 。C -NMR (CDC l 3, 125MH z) 数据见表1。以上数据与文献[4]报道的基本一致, 故鉴定化合物4为羽扇豆醇(lupeol) 。

化合物12 无色油状物(氯仿), E I -M S m /z721[M +Na ]。H-NMR (CDC l 3, 400MH z) D :0178@2, 0180, 0181, 0189, 1105, 1106, 1114(each 3H, s , M e -18, 19, 21, 26, 27, 28, 29, 30), 0182(3H, , t J =619H z , H-16c ), 3166(1H, , t J =714H z , H-24),

4141(1H, dd , J =516, 1016H z , H-3) 。C -NMR (CDC l 。以上数据与文献3, 100MH z) 数据见表1[11]报道的基本一致, 故鉴定该化合物12为o ligan -thasA 。

化合物13 无色油状物(氯仿), E I -M S m /z705[M +Na ]。H-NMR (CDC l 3, 400MH z) D :0184@2, 0186@2, 0195, 1113, 1162, 1178(each 3H, s , M e -18, 19, 21, 26, 27, 28, 29, 30), 0186(3H, , t J =619H z , H-16c ), 4147(1H, dd , J =517, 1015H z , H-3), 5111(1H, , t J =710H z , H-24) 。C -NMR (CDC l 。以上数据与文献3, 100MH z) 数据见表1[12-13]报道基本一致, 故鉴定化合物13为达玛烯二醇3-O -棕榈酸酯(da mm arenediol II 3-O -pal m -i tate) 。

化合物14 无色油状物(甲醇) , E I -M S m /z721[M +Na ]。H-NMR (CDC l 3, 400MH z) D :#+

0182@2, 0185@2, 0195, 1109, 1112, 1118(each 3H,

s , M e -18, 19, 21, 26, 27, 28, 29, 30), 0185(3H, , t J =710H z , H-16c ), 3161(1H, dd , J =515, 910H z , H-24), 4145(1H, dd , J =517, 1016H z , H-3) 。C -NMR (CDC l 3, 100MH z) 数据见表1。以上数据与文献[13]报道基本一致, 故鉴定化合物14为拟人参皂苷元II 3-O -棕榈酸酯(ocotillol II 3-O -pal m itate) 。化合物15 白色粉末(甲醇), m p 78~80e 。

E I -M S m /z509[M+Na ]。H-NMR (CDC l 3, 400MH z) D :0177, 0184, 0186, 0195, 0197, 1113, 1133, 1135(each 3H, s , M e -18, 19, 21, 26, 27, 28, 29, 30), 3119(1H, dd , J =510, 1112H z , H-3), 5160(1H, d , J =1119H z , H-24), 5176(1H, m ), 8107(1H, br s , OOH ) 。C -NM R (CDC l 3, 100MH z) 数据见表1。以上数据与文献[14]报道基本一致, 故鉴定化合物15为3B , 20S -二羟基-25-过氧羟基-23E -烯-达玛烷[(E )-25-hydroperoxyda mm ar -23-ene -3B , 20-d i o l]。

化合物16 无色针晶(甲醇), mp 138~140e 。E I -M S m /z647[M +N a ]。H-NMR (DM SO-d 6, 500MH z) D :7145(1H, d , J =1518H z , H-7), 7102(1H, d , J =119H z , H-2), 6197(1H, dd , J =119, 813H z , H-6), 6176(1H, d, J =813H z , H-5), 6163(1H, d , J =210H z , H-1c ), 6162(1H, d , J =810H z , H-6c ), 6150(1H, dd , J =210, 810H z , H-5c ), 6119(1H, d , J =1518H z , H-8), 5104(1H, s , H-Rha -1), 4172(1H, , t J =918H z , H-G lc -4), 4135(1H, d, J =718H z , H-G lc -1), 3189(1H, q , J =810H z , H-8a), 3171(1H, , t J =913H z , H-G lc -3), 3168(1H, m, H-G lc -6a), 3160(1H, q , J =810H z , H-8b), 3145(2H, m, H-G lc -5, H-G lc -6b), 3136-3170(3H, m , H-Rha -2, 3, 5), 3123(1H, , t J =813H z , H-G lc -2), 3112(1H, , t J =913H z , H-Rha -4), 2170(2H, m , H-7), 0197(3H, d , J =612H z , H-Rha -6) 。C -NMR (D M SO-d 6, 125MH z) D :16516(C -9), 14815(C -4), 14515(C -3), 14515(C -7), 14419(C -3c ), 14315(C -4c ), 12911(C -1c ), 12514(C -1), 12114(C -6), 11915(C -6c ), 11613(C -2c ), 11517(C -5c ), 11514(C -8), 11417(C -2), 11315(C -5), 10213(C -G lc -1), 10112(C -Rha -1), 7910(C -G lc -3), 7415(C -G lc -2), 7415(C -G lc -5), 7117(C -Rha -4), 7015(C -Rha -2), 7014(C -Rha -3), 7012(C -8c ), 6911(C -G lc -4), 6817(C -Rha -5), 6017(C -G lc -6), 3510(C -

No 11234

[***********]6171819

438. 927. 879. 139. 055. 518. 434. 541. 050. 637. 321. 125. 438. 343. 027. 435. 743. 148. 548. 1

1238. 723. 780. 537. 9

55. 918. 135. 240. 450. 737. 121. 527. 342. 950. 031. 425. 749. 515. 416. 5

1338. 723. 780. 537. 9

55. 918. 135. 140. 450. 537. 021. 527. 542. 250. 331. 224. 849. 815. 516. 4

表1 化合物4, 12~15的13C -NM R 数据

1438. 723. 780. 537. 955. 918. 135. 240. 350. 737. 021. 826. 942. 850. 031. 825. 849. 815. 416. 5

1538. 927. 579. 039. 055. 818. 235. 240. 450. 637. 121. 524. 942. 550. 331. 127. 450. 316. 416. 2

No 120212223

[**************]c 2c 3c 4c -13c 14c 15c 16c

4150. 930. 040. 128. 1

15. 416. 115. 914. 618. 1109. 319. 4

1286. 323. 535. 726. 183. 371. 324. 227. 316. 227. 916. 4173. 634. 825. 131. 922. 614. 1

1375. 325. 440. 522. 5124. 7131. 525. 717. 728. 016. 516. 2173. 634. 825. 131. 922. 714. 1

1486. 427. 134. 827. 0

86. 270. 124. 027. 716. 227. 916. 3173. 534. 825. 131. 922. 614. 1

1575. 125. 643. 3127. 1

137. 482. 024. 124. 528. 015. 315. 5

29. 1-29. 729. 1-29. 729. 0-29. 7

注:化合物4的测试溶剂为CD 30D , 12~15为CDC l 3。

7c ), 1811(C -Rha -6) 。以上数据与文献[15]报道基本一致, 故鉴定化合物16为毛蕊花苷(ver basco -si d e) 。

化合物17 白色粉末(甲醇), m p 86~90e 。E I -M S m /z339[M +Na ]。H-NMR (D 2O, 400MH z) D :7106(1H, d , J =115H z , H-2), 7175(2H, m, H-5, 6), 4174(1H, d , J =718H z , H-1c ), 3170(2H, , t J =710H z , H-8), 2170(2H, , t J =710H z , H-7);

H z , H-7) 。C -NMR (CD 3OD, 100MH z) D :15617(C -4), 13019(C -216), 13018(C -1), 11614(C -3, 5), 11110(C -1d ), 104, 4(C -1c ), 8015(C -3d ), 7810(C -3c ), 7717(C -2d ), 7619(C -5c ), 7511(C -2c ),

7510(C -4d ), 7212(C -8), 7117(C -4c ), 6817(C -6c ), 6516(C -5d ), 3614(C -7) 。以上数据与文献[17]报道基本一致, 故鉴定化合物19为os m anthu -side H 。

化合物1与标准品对照, 在HPTLC 中的R f 值及显色行为一致, 且混合熔点不下降, 鉴定为齐墩果酸; 化合物2, 3, 5~11, 18和20的波谱数据与文献对照, 结构分别确定为2A -羟基齐墩果酸墩果酸

[3]

[2]

C -NMR (D 2O , 100MH z) D :14618(C -4),

14616(C -3), 13211(C -1), 12512(C -6), 11917(C -2), 11711(C -5), 10414(C -1c ), 7813(C -3c ), 7717(C -5c ), 7419(C -2c ), 7114(C -4c ), 6413(C -8), 6215(C -6c ), 3615(C -7) 。以上数据与文献[16]报道的基本一致, 故鉴定化合物17为北升麻宁(c i m -i dahurinine) 。

化合物19 黄色粉末(甲醇) 。E I -M S m /z431[M-H ]。H-NMR (CD 3OD, 400MH z) D :7105(2H, d , J =815H z , H-2, 6), 6169(2H, d , J =815H z , H-3, 5), 5100(1H, d , J =

214H z , H-1d ), 4126(1H, d , J =718H z , H-1c ), 3199(1H, m , H-8a), 3194(1H, d , J =916H z , H-4d ), 3188(1H, d , J =214H z , H-2d ), 3174(1H, d , J =916H z , H-4d ), 3, 68(1H, m, H-8b), 3155(2H, s , H-5d ), 2182(2H, , t J =618

-1

、乙酰齐

、白桦脂醇

[5]

、达玛烯二醇

[7]

[6]

、3B -乙酰氧

基-20, 25-环氧-24A -羟基-达玛烷24A -二羟基-达玛烷醇烷

[13][18]

[8]

、20, 25-环氧-3B ,

、3B -乙酰氧基-达玛烯二

、3B , 20S -二羟基-24R -过氧羟基-24-烯-达玛、fouqu ierol

[18]

、2-(3, 4-二羟基苯基) 乙基-O-、3, 4-二羟基苯基乙醇

[20]

B -D 吡喃葡萄糖苷

[参考文献]

[19]

。

[1] 金华. 中药女贞子化学成分的研究现状[J].吉林化工学院

学报, 2008, 25(2):35, 41.

[2] 刘普, 段宏泉, 潘勤, 等. 委陵菜三萜成分研究[J ].中国中

药杂志, 2006, 31(22):1875.

[3] 郭夫江, 林绥, 李援朝. 鹅掌藤中三萜类化合物的分离与鉴

定[J].中国药物化学杂志, 2005, 67(10):294.

[4] 薛慧清, 杨红澎, 汪汉卿, 等. 黄毛橐吾三萜类成分研究

[J ].中国中药杂志, 2008, 33(3):272.

[5] 孙佳明, 杨峻山. 破骨风化学成分的研究[J].中国药学杂

志, 2007, 42(7):489.

[6] Tan s aku l P , Sh i buya M, Kush i ro T ,

et a. l Da mm arened i o-l II

s ynthase , t h e first d ed i cated enz ym e f or gi n s enos i de b iosyn t hesis , i n Panax g i n se ng [J].FEBS Lett , 2006, 580:5143.

[7] Sha m s u r Rouf A S, Ozak iY, Ras h i d M A ,

che m istry , 2002, 56:815.

[8] Xu X H, Y ang N Y, Q i an S H, et a. l Da mm aran e tri terpenes

fro m L i gustrum luci dum [J].J A sian Nat Prod Res , 2008, 10(1):33.

[9] 周剑宁, 欧阳明安. 药用女贞属植物化学成分的研究进展

[J ].天然产物研究与开发, 2003, 15(1):77.

[10] 郭晓秋, 单安山, 曲哲会, 等. 女贞子对动物免疫功能的影

响[J].中国饲料, 2006(1):9.

[11] L iX H, Q IH Y , Sh iY P. Da mm arane -and t araxtane -type f ro m

S au ssu rea oli gantha Fran c h [J].J A sian Nat Prod Res , 2009, 10(5):397.

[12] 吴立军, 相婷, 侯伯玲, 等. 女贞子化学成分的研究[J].植

物学报, 1998, 40(1):83.

[13] Uk iyaM , A kihisaT, Yas uka w a K, et a. l Con stit u ents of co m os-i

[18] [17]

et a. l D a mm arane

d eri vati ves fro m t he d ri ed fru i ts of Fors y t h i a su s pense [J].Phyt o -

tae plants . 2. T rit eren e d i o l s , tri ols , and their 3-O -fatty aci d es -ters fro m ed i b l e chrysan t he m um fl ow er extract and t he i r an t-i i n -fl a mm atory effects [J ].J Agri c Food Ch e m, 2001, 48(7):3187.

[14] Ju li an a de B C, Rai m undo B F , M arcus V A, et a. l

H and 13C

N M R spectra l assignm ents of four da mmaran e triterpen oi ds fro m carnauba w ax [J].M agn Reson C he m, 2006, 44:641.

[15] 李教社, 赵玉英, 王邠. 密蒙花中苯乙醇苷的分离和鉴定

[J].中国中药杂志, 1997, 22(1):613.

[16] Sug i ya m aM, K iku ch iM. Stud i es on the constit uen ts of Os m an -t hu s s p ecies . X. S tructures of phenolic gl u cos i des f ro m t he leaves of Os m anthu s asi a tic u s N akai [J].Che m Phar m Bu l, l 1992, 40(2):325.

Ida Y, Satoh Y, Oh ts uka M , et a. l Phenoli c constit uen ts of P hell od e ndron amure n se Bark [J ].Phytoche m i stry , (1):209.

Pakhat h irat h ien C, Karal ai C, Pongli m anont C, [J].J Nat Prod , 2005, 68(12):1787.

[19] 田军, 孙汉董. 长管假茉莉的化学成分[J].天然产物研究

与开发, 1999, 11(3):1.

[20] 夏文斌, 薛震, 李帅, 等. 杜鹃兰化学成分及肿瘤细胞毒活

性研究[J ].中国中药杂志, 2005, 30(23):1827.

et a. l Da m-m arane triterp enes fro m t he hypocotyls and fru i ts of C eri ops t aga l

1994, 35

Che m ical constituents fro m fruits of L i gustru m luci du m

HUANG X iaojun 1, Y IN Zh i qi 1*, YE W encai 1,

, S HEN W enb i n 3

(1. D epart men t of Phy toche m istry, China Phar m aceutical U ni ver sit y, N anj i ng 210009, China;

2. Institute of T raditional ChineseM e d icine and N atural P roducts , J inan Universit y, Guangzhou 510632, China;

3. Center of Instrument al A nal y sis , Ch i na Phar maceutical Universit y, N anjing 210009, Chi na)

[Abstract] O bjective :T o study t he chem ical constituents from the fru i ts o f Ligustru m luci du m . M e thod :The che m i ca l con -stituents from the ethano l ex tract of L. lucidum were iso lated and pur ifi ed by silica ge, l Sephadex L H-20, OD S co l u m n chrom atog raph ic m ethods . The ir struct u res we re i dentified on the basis of spectroscopic data and phy si co -che m i ca l properti es . R esult :Tw enty co m-pounds w ere iso lated and i dentified as o l eano li c ac i d (1), cra tego li c ac i d (2) , acety l o leano lic acid (3), ace t y -l 20S -o l) (9) , 20S , 24R -da mma rane -25-ene -24-hydroperox y -3B , 20-d i o l (10),

l upeo l (4), betu li n (5),

da mma rened i o-l II (6), 3B -acety-l 20, 25-epoxyda mma rane -24A -o l (7), 25-epoxydamm arane -3B , 24A -d i o l (8) , da mm ar -24-ene -3B -fouqu i ero l (11), o liganthas A (12), da m-m arened i o l II 3-O -pal m itate (13), oco tillol II 3-O -pa l m itate (14), (E )-25-hydroperoxydamm ar -23-ene -3B , 20-d i o l (15), verbasco -si de (16), ci m i dahuri n i ne (17), 2-(3, 4-di hydroxyphenyl) -ethy l -O-B -D -g lucopy ranos i de (18) , os m anthusi de H (19), 2-(3, 4-d-i hydrox ypheny l) e t hano l (20). Conc l u sion :Compounds 4, 16, 17, 19w ere i so lated fro m t h is plan t for t he first ti m e , and compounds 12-15we re iso l a ted from th i s g enus for t he first ti m e .

[K ey words] L i gustrum lucidu m ; che m ica l constit uents ; tr iterpeno i d ; pheny lethano i d g lycosi des

do:i 10. 4268/cjc mm 20100712

[责任编辑王亚君]

女贞子的化学成分研究_黄晓君

相关文章