球等鞭金藻3011的生长与其营养盐关系的研究

编号：XH03JW037-11/0

厦门海洋职业技术学院

毕业设计（论文）

题目: 球等鞭金藻3011的生长与其营养盐关系的研究

系 别：生 物 系

班 级： 水 产 养 殖 技 术3081

姓 名：刘 臻

学 号：0805303023

指导教师：李 碧 全

2011年 4 月 28 日

球等鞭金藻3011的生长与其营养盐关系的研究

【摘要】：球等鞭金藻是一种金黄色的微小金藻，由于其个体小（直径5um 左右），繁殖快，胞内营养丰富，无细胞壁，容易被动物幼虫消化吸收。目前，该藻类已经广泛的用于无饲喂贻贝，牡蛎，泥蚶等，并被认为是海产双壳类动物幼虫的理想饵料。有关球等鞭金藻培养文章很多，但营养盐方面发表还是很少的，所以对该藻类培养液的主要成分研究很重要。

【关键词】：球等鞭金藻，生长，营养盐。

球等鞭金藻(Isochrysis galbana) 是一种分布广泛的浮游单细胞藻类，属于金藻门，金藻纲，等鞭金藻目，等鞭金藻科，等鞭金藻属，由于个体小，繁殖速度快，营养丰富，运动速度适中，又没有纤维素的细胞壁，容易被贝类幼虫捕捉，吞食和消化吸收，因而是海产经济双壳动物幼虫的良好基础饵料。有关球等鞭金藻培养文章很多，但营养盐方面发表还是很少的，所以对该藻类培养液的主要成分研究很重要。

1 材料和方法 1.1试验材料

球等鞭金藻由宁波大学藻种室提供，试验前，先将球等鞭金藻接种到5000ml 的三角烧瓶中进行一级培养，光照3000Lx 左右，温度在21—26℃，不充气培养，每天摇动搅拌6次。

1.2 藻类培养的条件

培养藻类的用水取自漳浦前亭沙崎村海区的海水，经高位黑暗沉淀，再经过脱脂棉过滤，煮沸，冷却的天然海水。pH 8.5 密度1.018g/m3。培养容器都经过草酸洗涤，晾干，密封保存。

1.3实验方法与设计

本实验分别对球等鞭金藻3011的生长进行了 N ，P ，Fe ，维生素B 1，维生素B 12，等营养成分单因子和正交实验。

1.3.1 单因子实验的设计 氮的试验以 NH 4Cl ，（NH 4）2SO 4，NaNO 3和（NH 2）2CO 作为氮源，设置6个梯度，N 的质量浓度分别是0，10，20，40，60，80g/m3；磷的试验以NaH 2PO 4和KH 2PO 4作为磷源，设置6个梯度，磷的质量浓度分别是0，0.1，0.5，1，2，4g/m3；铁的试验以柠檬酸铁作为铁源，设置6个梯度，其的质量浓度为0，0.05，0.1，0.2，0.4，0.8 g/m3。

1.3.2 正交实验设计

每个试验分别进行平行试验，重复2组。试验结果采用血球计数板计数，藻

液用少许福尔马林固定后1d 内计完，每瓶计4个数，取其的平均值，所得生长率都以下面的公式计算公式为：K=（lnN t -lnN o ）/ln2(t-to)。其中N t 为试验进行t 天的细胞数目，N o 试验初始的细胞数目。

2. 结果

2.1 生长指数测定

【1】

利用等鞭金藻OA-3011培养液（陈淑芬等，1987） NaNO 3 60mg KH 2PO 4 4mg 柠檬酸铁 0.5mg 维生素B1 100-500ug 维生素B12 0.5-1.5ug 海水 1000ml

接种密度为20万/ml，置于自然条件下（光照3000Lx 左右，温度在21—26℃）每日定时计数，共9d ，结果见表1。并用细胞数目的对数和时间作图。

细胞数目的对—5.447 5.801 5.943 6.024 6.106 6.146 6.235 6.250

数 — K 值 —0.617 0.920 0.773 0.647 0.574 0.523 0.469 0.417

—

图1细胞数目的对数和时间关系

2.2 氮的单因子试验

我们对不同的氮源的氮和不同质量含量的氮进行了试验，以NH 4Cl ，（NH 4）2SO 4，NaNO 3和（NH 2）2CO 作为氮源，培养用水加母液（缺氮）设置6个梯度，N 的质量浓度分别是0，10，20，40，60，80g/m3，数据处理见表2。 由表2可知，球等鞭金藻3011喜欢NaNO 3这种氮源，并且以10g/m3为最好，尿素次之，

NH 4Cl ，（NH 4）2SO 4则不能使用。

t K 值为负数。

2.3 磷的单因子试验

我们以NaH 2PO 4和KH 2PO 4作为磷源，培养用水加母液（缺磷）设置6个梯度，

3

P 的质量浓度分别0，0.1，0.5，1，2，4g/m，处理结果见表3，从表3知道，NaH 2PO 4和KH 2PO 4对球等鞭金藻的影响效果不显著。

注：接种密度N t =70万，自然光照，t=8d，T=25℃。 2.4 铁的单因子试验

以柠檬酸铁作为铁源。培养用水加母液，设置6个梯度，其的质量浓度为0，0.05，0.1，0.2，0.4，0.8 g/m3。结果见表4。 表4名称 组别 1 2 3 4 5 6

柠檬酸铁质量浓0 0.05 0.1 0.2 0.4 0.8 度（g/m3）

0.033±0.369±0.364±0.364±0.360±0.354±

柠檬酸铁的K 值 0.001 0.001 0.002 0.001 0.003 0.001

注：接种密度N t =38万，自然光照，t=8d，T=23℃。 2.5 维生素试验

维生素对金藻来说不可缺少，试验处理方案及结果见表5，由表格可以知道，得知，球等鞭金藻对维生素的要求以维生素B 12和维生素B 1混合使用为最佳。

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3 结论

1）根据表1得知，可以看到藻类具有一天的延缓期，从第二天就出现指数生长期，持续时间打7天，其静止期较长，说明，不易老化。 2）从表2看出，4种氮源以NaNO 3这种氮源效果最好，并且以10g/m3为最好，尿素次之，NH 4Cl ，（NH 4）2SO 4则不能使用。且随浓度增大，生长受阻。许多试验表明，不同种类的单胞藻能利用不同的氮源，对氮的浓度要求也不一样【2,3】。游离氮对动、植物有毒作用，在藻类培养的过程中，随着CO 2被藻类吸收，使得培养液的pH 升高，使NH 4+易变成NH 3，而使藻类有毒，从而NH 4Cl ，（NH 4）2SO 4则不能使用。

3）磷的试验，从表中可以看出NaH 2PO 4和KH 2PO 4对球等鞭金藻的影响效果不显著。

1 g/m3 NaH 2PO 4效果较好。

4）铁的试验，从表中可以看出，以0.1 g/m3的柠檬酸铁效果最好。

【】

5）许多学者以证实，维生素B 1和维生素B 12是等鞭金藻生长发育所必须的4,5。Ford 【6】也证明，球等鞭金藻细胞分裂速度取决于维生素B 12的浓度。维生素B 12对促进球等鞭金藻生长有很好的效果，与维生素B 1混合使用的效果好于单用，且以维生素B 1 0.1 g/m3和维生素B 12 0.0005 g/m3为好。 从本实验结果看出，藻类的生长初期具有一定时间的延迟期，在外界条件同样时候，藻类需要的营养盐浓度不同，对藻类的生长是不同的。相同的是，维生素B 12和维生素B 1一起用对藻类生长有良好效果。

【参考文献】

【1】 成永旭等，生物饵料培养，金藻培养液配方，球等鞭金藻AO-3011，【M 】。

1987，79-80。

【2】 陈明耀，生物饵料培养【M 】。北京：中国农业出版社，1995。 【3】 马志珍，氮源及其浓度对三角褐指藻生长的影响【J 】，海洋湖沼通报，

1983，（2）,45-50。

【4】 陈椒芬，潘永饶，等鞭金藻的生长及主要成分研究，【J 】，海洋湖沼通

报，1987，18（1）55-63。

【5】 张道南，绿色巴夫藻用于罗氏沼虾人工生态育苗【J 】，上海水产大学学

报，1994，（3），1-2。