多西紫杉醇注射液的稳定性考察

中国临床药学杂志 CHINESE JOURNAL OF CLINICAL PHARMACY 2007年第16卷第4期

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对照组用左氧氟沙星(扬子江药业集团有限公司, 批号:0508302) , 0. 2g, po , bid, 连用1wk 。在治疗前和停药后7、14d 检查病原体并观察患者的症状和体征。

1. 3疗效评价标准 治愈:临床症状与体征消失, 停药后7、14d 连续2次病原体检测均为阳性; 有效:临床症状与体征明显好转, 病原体检测仍有1次为阳性; 无效:临床症状与体征均无好转, 病原体检测为阳性。治愈和有效合计为有效, 并据此计算总有效率。

1. 4统计学处理 采用 2检验和Ridit 分析。2 结果

2. 1临床疗效 试验组48例, 治愈46例, 有效2例, 治愈率为95. 8%, 总有效率100%; 对照组48例, 治愈28例, 有效12例, 治愈率为58. 3%, 总有效率83. 3%。2组疗效比较经Ridit 分析差异有统计学意义(P

2. 2不良反应 试验组5例出现恶心、轻度腹泻, 3例出现轻度头痛、头晕, 停药后均消失; 对照组4例出现恶心、轻度腹泻, 7例出现头晕、疲乏, 停药后均消失。2组的不良反应发生率分别为16. 7%和22. 9%, 经 2检验无统计学意义(P >0. 05) 。3 讨论

非淋菌性泌尿生殖道炎是指由淋菌以外的其他

病原体, 主要是沙眼衣原体、尿素分解支原体所引起的尿道炎(我们分别采用细胞培养法和酶联免疫吸附试验检测衣原体和支原体) 。目前我国这类病例日益增多。

加替沙星是一种新型广谱8-甲氧氟喹诺酮抗生素, 口服易吸收, 静脉注射与口服具有生物等效性。加替沙星对革兰阴、阳性细菌, 衣原体, 支原体, 分支杆菌和厌氧菌等都有强大的杀菌作用[2]。其作用机制是通过生成DNA 、拓扑异构酶和氟喹诺酮类药物三元络合物而稳定拓扑异构酶-DNA 反应中间体, 从而抑制细菌DNA 的复制和转录, 达到抗菌目的[3]。我们的观察结果也表明加替沙星抗菌活性突出, 尤其在非淋菌性泌尿生殖道炎的疗效显著, 另外加替沙星的不良反应较少, 因此加替沙星值得临床推广。

参考文献

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(2005 12 07收稿)

[1]

多西紫杉醇注射液的稳定性考察

杨 蓓, 郑璐侠, 段更利 (复旦大学药学院药物分析教研室, 上海200032)

摘要 目的 考察多西紫杉醇注射液在不同条件下的稳定性。方法 系统考察不同条件下本品的稳定性, 条件分别为高温(40! ) 、4500l x 强光试验考察10d, 室温(25! ) 和低温(4! ) 试验各考察3mo 。建立一个简单的HPLC 法用于稳定性试验中多西紫杉醇和降解产物的含量测定。色谱条件为:色谱柱Alltima C 18柱(150mm ∀4. 6m m, 5 m) , 以甲醇#20mmol ∃L -1醋酸钠缓冲液(p H 5. 0) (74#26) 为流动相, 流速1. 0mL ∃mi n -1, 检测波长232nm 。结果 除低温避光条件外, 多西紫杉醇注射液含量均有明显下降。建立的HPLC 法在25~500mg ∃L -1时线性方程为y =7. 009∀10-4x +1. 0276(r =0. 9998) , 日内、日间RSD 均

文献标识码 B 文章编号 1007 4406(2007) 04 0239 03

作者简介 杨 蓓(1981-) , 女, 在读硕士研究生。研究方向:新药的研究和开发。

通信作者 段更利(1954-) , 教授。从事新药质量标准研究和体内方法学研究。Tel:86 21 5423 7208; E mail:glduan@s hmu. edu. cn

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中国临床药学杂志 CHINESE J OURNAL OF C LINICAL PHARMACY 2007年第16卷第4期

Stability study of docetaxel injections

YANG Bei, ZHENG Lu xia, DUAN Geng li (Department o f Pharmaceutical Analysis, School o f Pharmacy , Fudan U niversity , Shanghai 200032, China)

ABSTRACT AIM To determine the stability of docetaxel injection under various storage conditions. MET HODS Samples of docetaxel injections were put under different conditions (4! , 25! , 40! and strong light of 4500lx) to de termine the content of docetaxel and its degradation products by a simple HPLC method. HPLC analyses were performed by using an Alltima C 18column (150mm ∀4. 6mm, 5 m) and UV detector at 232nm wavelength. The mobile phase consisted of methanol #20mmol ∃L -1sodium acetate (pH 5. 0) (74#26, V/V )with the flow ra te of 1. 0mL ∃min -1. RE SU LTS The content of docetaxel decreased re markably under all the experimental c onditions e xcept for 4! without light. The calibration curve was linear within the range of 25-500mg ∃L -1with the calibration equation y =7. 009∀10x +1. 0276(r =0. 9998). Both the intra and inter RSD were

KEY W ORDS docetaxel; injection; stability; HPLC 多西紫杉醇(docetaxel) 是一种半合成的新型抗肿瘤药物, 是从欧洲紫杉树针叶中提取的无活性前体经化学处理后得到的活性药物, 能有效地抑制肿瘤细胞的复制, 作用于细胞G2~M 生长期。临床研究表明, 多西紫杉醇对多种肿瘤有效, 包括非小细胞肺癌、乳腺癌和卵巢癌, 单独用药和联合用药均有显著疗效。目前多西紫杉醇主要是以吐温-80溶液作为溶剂, 制成注射液使用。国内外文献[1~3]报道其分析方法为HPLC UV 法和HPLC MS 法[4]对生物样品中的多西紫杉醇或者其制剂进行测定。Judith 等[5]考察了室温和冷藏条件对于不同包装的多西紫杉醇注射液物理稳定性和化学稳定性的影响, 但未对影响其制剂稳定性的各种因素进行系统评价。我们首次对多西紫杉醇注射液在不同贮藏条件下的稳定性进行全面考察, 建立并优化了一种简便的高效液相色谱-紫外检测法用于测定多西紫杉醇及降解产物的含量, 从而为确定其合理的有效期和贮藏条件提供了可靠的依据。

1 材料

1. 1仪器 LC-10AT 型高效液相色谱仪(日本岛津) ; SPD-10A 紫外检测器(日本岛津) ; N2000-色谱数据工作站(浙江大学智能信息工程研究所) 。1. 2药品和试剂 多西紫杉醇注射液(浙江万马医药研究中心, 规格:80mg ∃2m L ; 批号20000607、20000610、20000615) , 多西紫杉醇对照品(浙江万马-1

-4

酸、醋酸钠均为分析纯, 去离子纯水由Millipore Di rect Q 纯净水发生器制得。

2 方法与结果

2. 1色谱条件 色谱柱:Alltima Rp C 18(150mm ∀4. 6mm, 5 m) ; 柱温#室温; 流动相:甲醇#20mmol ∃L -1醋酸钠缓冲液(冰醋酸调pH 值至5. 0) =74#26(V/V ) ; 流速1. 0mL ∃min -1; 紫外检测波长232nm; 进样量20 L 。

2. 2标准曲线 取多西紫杉醇对照品适量, 精密称定, 用甲醇溶解并定量稀释成1. 0g ∃L -1的贮备液。精密吸取上述贮备液0. 25、0. 5、1、1. 5、2、5mL 分别以甲醇定容至10mL, 成为25、50、100、150、200、500

-1

mg ∃L 的对照品溶液。精密量取20 L 注入色谱仪, 记录色谱图, 以多西紫杉醇峰面积(y ) 对质量浓度(x ) 作线性回归, 得标准曲线方程为y =7. 009∀10-4x +1. 0276(r =0. 9998) 。

2. 3方法专属性 通过将样品放置于不同条件(高温、强光、室温和低温) 考察方法的专属性。结果表明, 在该色谱条件下, 多西紫杉醇和降解产物分离良好, 多西紫杉醇的保留时间约为7. 28min, 见图1。2. 4回收率和精密度试验 精密吸取储备液, 按照%2. 2&制备方法, 配制成质量浓度为定量限(25mg ∃L -1) 、低(50mg ∃L -1) 、中(200mg ∃L -1) 、高(500mg ∃L -1) 的对照品溶液, 测定其方法回收率和日内、日间RSD(表1) , 结果表明该方法的精密度和准确度

中国临床药学杂志 CHINESE JOURNAL OF CLINICAL PHARMACY 2007年第16卷第4期

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表2 稳定性试验结果

处理方式

多西紫杉醇

未经处理4500lx 光照5d 4500lx 光照10d 40! 放置5d 40! 放置10d

99. 4∋0. 896. 2∋0. 593. 4∋0. 893. 8∋1. 790. 5∋0. 992. 3∋1. 490. 3∋1. 099. 6∋1. 2

(n =3, x ∋s )

平均相对标示量浓度/%

降解产物0. 77∋0. 053. 75∋0. 076. 38∋0. 166. 21∋0. 139. 32∋0. 207. 28∋0. 149. 18∋0. 190. 89∋0. 06

图1 多西紫杉醇及其降解产物高效液相色谱图

1、2、4、5为降解产物; 3为多西紫杉醇

25! 放置1mo 25! 放置3mo 4! 放置3mo

表1 方法回收率和精密度试验(n =5, x ∋s )

(加入)/

mg ∃L -1

2550200500

回收率/%98. 099. 398. 8102. 4

日内精密度 (测得) /mg ∃L -124. 5∋0. 549. 7∋2. 1197∋10512∋18

R SD/%2. 045. 164. 863. 51

日间精密度 (测得) /mg ∃L -125. 5∋0. 748. 5∋1. 6199∋8506∋18

RSD/%2. 923. 214. 013. 74

稳定性的影响。试验结果表明, 多西紫杉醇对光敏感, 在本试验所采用的强光照射(4500lx) 条件下随放置时间延长, 多西紫杉醇含量成线性下降; 多西紫杉醇对温度变化也很敏感, 在40! 放置时的降解速度显著快于25! 放置时的降解速度。由于在室温(25! ) 条件下放置3mo, 3批样品含量均下降约10%, 而有关降解产物增至近10%, 大大超过本注射液对于有关物质的质控指标(

参考文献

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(2006 01 27收稿)

2. 5多西紫杉醇注射液的稳定性考察

2. 5. 1光照的稳定性试验 将3批多西紫杉醇注射液样品于4500lx 光照强度下放置10d, 并分别于

0、5、10d 定时取样考察其稳定性。2. 5. 2高温的稳定性试验 将3批多西紫杉醇注射液样品于40! 的恒温烘箱中避光放置10d, 并分别于0、5、10d 定时取样考察其稳定性。2. 5. 3室温的稳定性试验 将3批多西紫杉醇注射液样品放置于25! 恒温烘箱中避光放置3mo, 分别于0、1、3mo 定时取样考察其稳定性。

2. 5. 4低温的稳定性试验 将3批多西紫杉醇注射液样品于4! 的冰箱中避光放置3mo, 分别于0、3mo 定时取样分析, 进行低温的稳定性试验。2. 6结果 精密量取稳定性试验中的待测样品0. 5mL, 用流动相稀释定容至50mL, 进样20 L, 进行含量测定; 精密量取待测样品1. 0mL, 用流动相稀释定容至25. 0mL, 进样20 L, 进行降解产物的含量测定, 结果见表2。3 讨论

本试验考察了温度和光照对多西紫杉醇注射液